INFORME DE LA PRACTICA 7

 El informe de la practica 7 se deberá presentar con los siguientes puntos:

Objetivos

Protocolo de extracción  del extracto presentado (diagrama de flujo)

Resultados.  Con los datos de que se publicaran de su muestra, calcular la concentración de DNA y la pureza de la misma.

Si Ud. hubiese corrido electroforéticamente su muestra, hasta que dilución (dilución seriada 1/2) sería visible la banda fluorescente, suponiendo que el volumen de siembra sea de 20 uL.  

Discusión.  Debe ser exhaustiva de acuerdo a los resultados.

Conclusiones.

Cuestionario que esta en la guía y ademas los siguientes problemas de acuerdo al día de practicas.

MARTES

EJERCICIOS DE CUANTIFICACION

1.       Una muestra de extracto crudo de DNA se somete a diluciones seriadas de 1/3.  Luego se siembra en el cada pozo del gel 7 ul de cada dilución hasta la decima,  se corre electroforéticamente  y luego se revela con bromuro de etidio.  En el transiluminador se observa fluorescencia hasta la cuarta dilución.  Calcule la concentración de DNA en el extracto.

2.       Se somete un extracto a 3 diluciones seriadas de 1/5 y se midio la absorbencia a longitudes de onda de 260, 280 y 320 nm, y se observo las siguientes lecturas: 0,941 – 0,115 y 0,657, respectivamente, calcular la concentración del extracto  e indicar su calidad.

3.       Calcular la dilución que se debe efectuar a un extracto puro de DNA de concentración de 349 ug/ml para que se puede leer al espectro.  Efectuada la dilución ¿cual es la DO a 260 nm?

MIERCOLES

EJERCICIOS DE CUANTIFICACION

1.       Una muestra de extracto crudo de DNA se somete a diluciones seriadas de 1/2.  Luego se siembra en el cada pozo del gel 8 ul de cada dilución hasta la decima,  se corre electroforéticamente  y luego se revela con bromuro de etidio.  En el transiluminador se observa fluorescencia hasta la cuarta dilución.  Calcule la concentración de DNA en el extracto.

2.       Se somete un extracto a 3 diluciones seriadas de 1/3 y se midio la absorbencia a longitudes de onda de 260, 280 y 320 nm, y se observo las siguientes lecturas: 0,941 – 0,115 y 0,657, respectivamente, calcular la concentración del extracto  e indicar su calidad.

3.       Calcular la dilución que se debe efectuar a un extracto puro de DNA de concentración de 243 ug/ml para que se puede leer al espectro.  Efectuada la dilución ¿cual es la DO a 260 nm?

JUEVES

EJERCICIOS DE CUANTIFICACION

1.       Una muestra de extracto crudo de DNA se somete a diluciones seriadas de 1/4.  Luego se siembra en el cada pozo del gel 9 ul de cada dilución hasta la decima,  se corre electroforéticamente  y luego se revela con bromuro de etidio.  En el transiluminador se observa fluorescencia hasta la cuarta dilución.  Calcule la concentración de DNA en el extracto.

2.       Se somete un extracto a 3 diluciones seriadas de 1/2 y se midio la absorbencia a longitudes de onda de 260, 280 y 320 nm, y se observo las siguientes lecturas: 0,941 – 0,115 y 0,657, respectivamente, calcular la concentración del extracto  e indicar su calidad.

3.       Calcular la dilución que se debe efectuar a un extracto puro de DNA de concentración de 414 ug/ml para que se puede leer al espectro.  Efectuada la dilución ¿cual es la DO a 260 nm?

LUNES

EJERCICIOS DE CUANTIFICACION

1.       Una muestra de extracto crudo de DNA se somete a diluciones seriadas de 1/5.  Luego se siembra en el cada pozo del gel 5 ul de cada dilución hasta la decima,  se corre electroforéticamente  y luego se revela con bromuro de etidio.  En el transiluminador se observa fluorescencia hasta la cuarta dilución.  Calcule la concentración de DNA en el extracto.

2.       Se somete un extracto a 3 diluciones seriadas de 1/4 y se midio la absorbencia a longitudes de onda de 260, 280 y 320 nm, y se observo las siguientes lecturas: 0,941 – 0,115 y 0,657, respectivamente, calcular la concentración del extracto  e indicar su calidad.

3.       Calcular la dilución que se debe efectuar a un extracto puro de DNA de concentración de 433 ug/ml para que se puede leer al espectro.  Efectuada la dilución ¿cual es la DO a 260 nm?