BIOLOGIA MOLECULAR: noviembre 2020

El informe de la practica 7 se deberá presentar con los siguientes puntos:

Objetivos

Protocolo de extracción del extracto presentado (diagrama de flujo)

Resultados. Con los datos de que se publicaran de su muestra, calcular la concentración de DNA y la pureza de la misma.

Si Ud. hubiese corrido electroforéticamente su muestra, hasta que dilución (dilución seriada 1/2) sería visible la banda fluorescente, suponiendo que el volumen de siembra sea de 20 uL.

Discusión. Debe ser exhaustiva de acuerdo a los resultados.

Conclusiones.

Cuestionario que esta en la guía y ademas los siguientes problemas de acuerdo al día de practicas.

MARTES

EJERCICIOS DE CUANTIFICACION

1. Una muestra de extracto crudo de DNA se somete a diluciones seriadas de 1/3. Luego se siembra en el cada pozo del gel 7 ul de cada dilución hasta la decima, se corre electroforéticamente y luego se revela con bromuro de etidio. En el transiluminador se observa fluorescencia hasta la cuarta dilución. Calcule la concentración de DNA en el extracto.

2. Se somete un extracto a 3 diluciones seriadas de 1/5 y se midio la absorbencia a longitudes de onda de 260, 280 y 320 nm, y se observo las siguientes lecturas: 0,941 – 0,115 y 0,657, respectivamente, calcular la concentración del extracto e indicar su calidad.

3. Calcular la dilución que se debe efectuar a un extracto puro de DNA de concentración de 349 ug/ml para que se puede leer al espectro. Efectuada la dilución ¿cual es la DO a 260 nm?

MIERCOLES

EJERCICIOS DE CUANTIFICACION

1. Una muestra de extracto crudo de DNA se somete a diluciones seriadas de 1/2. Luego se siembra en el cada pozo del gel 8 ul de cada dilución hasta la decima, se corre electroforéticamente y luego se revela con bromuro de etidio. En el transiluminador se observa fluorescencia hasta la cuarta dilución. Calcule la concentración de DNA en el extracto.

2. Se somete un extracto a 3 diluciones seriadas de 1/3 y se midio la absorbencia a longitudes de onda de 260, 280 y 320 nm, y se observo las siguientes lecturas: 0,941 – 0,115 y 0,657, respectivamente, calcular la concentración del extracto e indicar su calidad.

3. Calcular la dilución que se debe efectuar a un extracto puro de DNA de concentración de 243 ug/ml para que se puede leer al espectro. Efectuada la dilución ¿cual es la DO a 260 nm?

JUEVES

EJERCICIOS DE CUANTIFICACION

1. Una muestra de extracto crudo de DNA se somete a diluciones seriadas de 1/4. Luego se siembra en el cada pozo del gel 9 ul de cada dilución hasta la decima, se corre electroforéticamente y luego se revela con bromuro de etidio. En el transiluminador se observa fluorescencia hasta la cuarta dilución. Calcule la concentración de DNA en el extracto.

2. Se somete un extracto a 3 diluciones seriadas de 1/2 y se midio la absorbencia a longitudes de onda de 260, 280 y 320 nm, y se observo las siguientes lecturas: 0,941 – 0,115 y 0,657, respectivamente, calcular la concentración del extracto e indicar su calidad.

3. Calcular la dilución que se debe efectuar a un extracto puro de DNA de concentración de 414 ug/ml para que se puede leer al espectro. Efectuada la dilución ¿cual es la DO a 260 nm?

LUNES

EJERCICIOS DE CUANTIFICACION

1. Una muestra de extracto crudo de DNA se somete a diluciones seriadas de 1/5. Luego se siembra en el cada pozo del gel 5 ul de cada dilución hasta la decima, se corre electroforéticamente y luego se revela con bromuro de etidio. En el transiluminador se observa fluorescencia hasta la cuarta dilución. Calcule la concentración de DNA en el extracto.

2. Se somete un extracto a 3 diluciones seriadas de 1/4 y se midio la absorbencia a longitudes de onda de 260, 280 y 320 nm, y se observo las siguientes lecturas: 0,941 – 0,115 y 0,657, respectivamente, calcular la concentración del extracto e indicar su calidad.

3. Calcular la dilución que se debe efectuar a un extracto puro de DNA de concentración de 433 ug/ml para que se puede leer al espectro. Efectuada la dilución ¿cual es la DO a 260 nm?